sasava

ক্রোমাটোগ্রাফির উৎপত্তি

ক্রোমাটোগ্রাফি, যা "ক্রোমাটোগ্রাফিক বিশ্লেষণ", "ক্রোমাটোগ্রাফি" নামেও পরিচিত, একটি পৃথকীকরণ এবং বিশ্লেষণ পদ্ধতি, যা বিশ্লেষণাত্মক রসায়ন, জৈব রসায়ন, জৈব রসায়ন এবং অন্যান্য ক্ষেত্রগুলিতে প্রয়োগের একটি খুব বিস্তৃত পরিসর রয়েছে।

ক্রোমাটোগ্রাফির প্রতিষ্ঠাতা হলেন একজন রাশিয়ান উদ্ভিদবিজ্ঞানী এম টিসভেটার।1906 সালে, রাশিয়ান উদ্ভিদবিজ্ঞানী জেভেটার তার পরীক্ষার ফলাফল প্রকাশ করেছিলেন: উদ্ভিদের রঙ্গকগুলিকে পৃথক করার জন্য, তিনি ক্যালসিয়াম কার্বনেট পাউডারযুক্ত একটি কাচের নলে উদ্ভিদের রঙ্গকযুক্ত পেট্রোলিয়াম ইথার নির্যাস ঢেলে দেন এবং উপরে থেকে নীচে পর্যন্ত পেট্রোলিয়াম ইথার দিয়ে এটিকে নির্গত করেন।ক্যালসিয়াম কার্বনেট কণার উপরিভাগে বিভিন্ন রঙ্গকগুলির বিভিন্ন শোষণ ক্ষমতা থাকায়, লিচিং প্রক্রিয়ার সাথে, বিভিন্ন রঙ্গক বিভিন্ন গতিতে নিচে চলে যায়, এইভাবে বিভিন্ন রঙের ব্যান্ড তৈরি করে।রঙ্গক উপাদান পৃথক করা হয়.তিনি এই বিচ্ছেদ পদ্ধতির নাম দেন ক্রোমাটোগ্রাফি।
ইমেজ1
একটি উদ্ভিদ পাতার রঙ্গক বিচ্ছেদ পরীক্ষার পরিকল্পিত উপস্থাপনা
বিচ্ছেদ পদ্ধতির ক্রমাগত বিকাশের সাথে, আরও বেশি বর্ণহীন পদার্থগুলি পৃথকীকরণের বস্তুতে পরিণত হয়, ক্রোমাটোগ্রাফিও ধীরে ধীরে "রঙ" এর অর্থ হারিয়ে ফেলে, তবে নামটি আজও ব্যবহৃত হয়।
ক্রোমাটোগ্রাফিক শ্রেণীবিভাগ
ক্রোমাটোগ্রাফির সারমর্ম হল এমন একটি প্রক্রিয়া যেখানে অণুগুলিকে বিভক্ত করা হয় এবং স্থির ফেজ এবং মোবাইল ফেজের মধ্যে ভারসাম্য বজায় রাখা হয়।বিভিন্ন পদার্থ দুটি পর্যায়গুলির মধ্যে আলাদাভাবে বিভাজন করা হয়, যা তাদের মোবাইল ফেজের সাথে বিভিন্ন গতিতে চলে যায়।মোবাইল ফেজের নড়াচড়ার সাথে সাথে মিশ্রণের বিভিন্ন উপাদান স্থির পর্যায়ে একে অপরের থেকে আলাদা হয়ে যায়।প্রক্রিয়ার উপর নির্ভর করে, এটি বিভিন্ন বিভাগে বিভক্ত করা যেতে পারে।
1, দুই-ফেজ শারীরিক অবস্থার শ্রেণীবিভাগ অনুযায়ী
মোবাইল ফেজ: গ্যাস ক্রোমাটোগ্রাফি, লিকুইড ক্রোমাটোগ্রাফি, সুপারক্রিটিক্যাল ফ্লুইড ক্রোমাটোগ্রাফি
স্থির পর্যায়: গ্যাস-কঠিন, গ্যাস-তরল;তরল-কঠিন, তরল-তরল
2, নিশ্চল ফেজ শ্রেণীবিভাগ ফর্ম অনুযায়ী
কলাম ক্রোমাটোগ্রাফি: প্যাকড কলাম ক্রোমাটোগ্রাফি, কৈশিক কলাম ক্রোমাটোগ্রাফি, মাইক্রোপ্যাকড কলাম ক্রোমাটোগ্রাফি, প্রস্তুতিমূলক ক্রোমাটোগ্রাফি
সমতল ক্রোমাটোগ্রাফি: কাগজের ক্রোমাটোগ্রাফি, পাতলা স্তরের ক্রোমাটোগ্রাফি, পলিমার মেমব্রেন ক্রোমাটোগ্রাফি
3, বিচ্ছেদ প্রক্রিয়া অনুযায়ী শ্রেণীবদ্ধ
শোষণ ক্রোমাটোগ্রাফি: শোষণকারীর উপর তাদের শোষণ এবং শোষণ ক্ষমতা অনুসারে বিভিন্ন উপাদান পৃথক করা হয়
পার্টিশন ক্রোমাটোগ্রাফি: দ্রাবকের দ্রবণীয়তা অনুসারে বিভিন্ন উপাদান আলাদা করা হয়
আণবিক বর্জন ক্রোমাটোগ্রাফি: বিচ্ছেদের আণবিক আকারের আকার অনুযায়ী আয়ন বিনিময় ক্রোমাটোগ্রাফি: আয়ন-বিনিময় রজন পৃথকীকরণের জন্য সখ্যতার বিভিন্ন উপাদান
অ্যাফিনিটি ক্রোমাটোগ্রাফি: জৈবিক ম্যাক্রোমোলিকুলের মধ্যে একটি নির্দিষ্ট সখ্যতার উপস্থিতি ব্যবহার করে বিচ্ছেদ
কৈশিক ইলেক্ট্রোফোরেসিস: গতিশীলতা এবং/অথবা পার্টিশন আচরণের পার্থক্য অনুসারে উপাদানগুলি পৃথক করা হয়েছিল
চিরাল ক্রোমাটোগ্রাফি কাইরাল ওষুধের পৃথকীকরণ এবং বিশ্লেষণের জন্য ব্যবহৃত হয়, যা তিনটি বিভাগে বিভক্ত করা যেতে পারে: চিরাল ডেরাইভেটাইজেশন বিকারক পদ্ধতি;চিরল মোবাইল ফেজ সংযোজন পদ্ধতি;চিরল স্থির ফেজ রেজোলিউশন পদ্ধতি
ক্রোমাটোগ্রাফির জন্য মৌলিক পরিভাষা
সময়ের বিপরীতে ক্রোমাটোগ্রাফিক বিচ্ছেদ সনাক্ত করার পরে উপাদানগুলির প্রতিক্রিয়া সংকেতগুলি প্লট করে প্রাপ্ত বক্ররেখাগুলিকে ক্রোমাটোগ্রাম বলা হয়।

ইমেজ2

বেসলাইন:নির্দিষ্ট ক্রোমাটোগ্রাফিক অবস্থার অধীনে, যখন শুধুমাত্র মোবাইল ফেজ ডিটেক্টর সিস্টেমের মধ্য দিয়ে যায় তখন সিগন্যালের বক্ররেখাকে বেসলাইন বলা হয়, যেমনটি ওটি লাইনে দেখানো হয়েছে।যখন পরীক্ষামূলক অবস্থা স্থিতিশীল ছিল, তখন বেসলাইনটি অনুভূমিক অক্ষের সমান্তরাল একটি রেখা ছিল।বেসলাইন সময়ের সাথে সাথে যন্ত্রের, প্রধানত ডিটেক্টরের শব্দ প্রতিফলিত করে।

সর্বোচ্চ উচ্চতা:ক্রোমাটোগ্রাফিক পিক পয়েন্ট এবং বেসলাইনের মধ্যে উল্লম্ব দূরত্ব, h দ্বারা চিহ্নিত, যেমন AB' লাইনে দেখানো হয়েছে।

অঞ্চলের প্রস্থ:ক্রোমাটোগ্রাফিক শিখরের অঞ্চলের প্রস্থ সরাসরি পৃথকীকরণ দক্ষতার সাথে সম্পর্কিত।ক্রোমাটোগ্রাফিক পিক প্রস্থ বর্ণনা করার জন্য তিনটি পদ্ধতি রয়েছে: আদর্শ বিচ্যুতি σ, পিক প্রস্থ W, এবং FWHM W1/2।

আদর্শ বিচ্যুতি (σ):σ হল স্বাভাবিক বণ্টন বক্ররেখার দুটি প্রতিফলন বিন্দুর মধ্যে অর্ধেক দূরত্ব, এবং σ এর মান কলাম থেকে দূরে উপাদানগুলির বিচ্ছুরণের মাত্রা নির্দেশ করে।σ-এর মান যত বড় হবে, বর্জ্য উপাদান তত বেশি বিচ্ছুরিত হবে এবং বিভাজনের প্রভাব তত খারাপ হবে।বিপরীতভাবে, বর্জ্য উপাদানগুলি ঘনীভূত এবং পৃথকীকরণ প্রভাব ভাল।

পিক প্রস্থ W:ক্রোমাটোগ্রাফিক পিকের উভয় দিকের ছেদ বিন্দুগুলি স্পর্শক রেখা হিসাবে ব্যবহৃত হয়, এবং বেসলাইনে ইন্টারসেপ্টকে পিক প্রস্থ বা বেসলাইন প্রস্থ বলা হয়, যা চিত্র IJ-তে দেখানো হিসাবে W হিসাবেও প্রকাশ করা যেতে পারে।স্বাভাবিক বণ্টনের নীতি অনুসারে, সর্বোচ্চ প্রস্থ এবং আদর্শ বিচ্যুতির মধ্যে সম্পর্ক W=4σ হিসাবে প্রমাণিত হতে পারে।

W1/2:GH এর দূরত্বের জন্য দেখানো হিসাবে, অর্ধেক শিখর উচ্চতার শীর্ষের প্রস্থকে FWHM বলা হয়।W1/2=2.355σ, W=1.699W1/2।

W1/2, W উভয়ই σ থেকে প্রাপ্ত এবং কলামের প্রভাব পরিমাপ করার পাশাপাশি পিক এলাকা গণনা করতে ব্যবহৃত হয়।FWHM পরিমাপ আরও সুবিধাজনক এবং সর্বাধিক ব্যবহৃত হয়।

সারাংশ

ক্রোমাটোগ্রাফিক শিখর বহিঃপ্রবাহ বক্ররেখা থেকে, নিম্নলিখিত উদ্দেশ্যগুলি অর্জন করা যেতে পারে:

ক, ক্রোমাটোগ্রাফিক পিকগুলির ধারণ মানের উপর ভিত্তি করে গুণগত বিশ্লেষণ করা হয়েছিল

খ, ক্রোমাটোগ্রাফিক শিখরের ক্ষেত্রফল বা শিখরের উপর ভিত্তি করে পরিমাণগত বিশ্লেষণ

C. ক্রোমাটোগ্রাফিক পিকের ধারণ মান এবং সর্বোচ্চ প্রস্থ অনুসারে কলামের বিচ্ছেদ দক্ষতা মূল্যায়ন করা হয়েছিল

ক্রোমাটোগ্রাফিতে জড়িত গণনার সূত্র

1. ধরে রাখার মান

ধারণ মান হল একটি প্যারামিটার যা কলামে একটি নমুনা উপাদান ধরে রাখা হয় এবং ক্রোমাটোগ্রাফিক চরিত্রায়নের সূচক হিসাবে ব্যবহৃত হয় তা বর্ণনা করতে ব্যবহৃত হয়।এর উপস্থাপনা পদ্ধতি নিম্নরূপ:

ধরে রাখার সময় টিআর

মৃত্যুর সময়tM

ধরে রাখার সময় টিআর সামঞ্জস্য করুন'=tR-টিএম

(স্থির পর্যায়ে ব্যয় করা মোট সময়)

ধরে রাখার পরিমাণ

VR=tR*F. (মোবাইল ফেজ বেগ থেকে স্বাধীন)

মৃত ভলিউম

VM=tM*Fc

(ইনজেক্টর থেকে ডিটেক্টর পর্যন্ত প্রবাহ পথে স্থির ফেজ দ্বারা স্থান দখল করা হয়নি)

ধারণ ভলিউম VR সামঞ্জস্য করুন'=t'R*এফসি

2. আপেক্ষিক ধরে রাখার মান
আপেক্ষিক ধারণ মান, যা বিচ্ছেদ ফ্যাক্টর, পার্টিশন সহগ অনুপাত বা আপেক্ষিক ক্ষমতা ফ্যাক্টর নামেও পরিচিত, নির্দিষ্ট ক্রোমাটোগ্রাফিক অবস্থার অধীনে মানদণ্ডের সামঞ্জস্যপূর্ণ ধরে রাখার সময় (ভলিউম) এর সাথে পরীক্ষিত উপাদানের সামঞ্জস্যপূর্ণ ধরে রাখার সময় (ভলিউম) এর অনুপাত।

image3

আপেক্ষিক ধারণ মানগুলি নির্দিষ্ট অপারেটিং অবস্থার প্রভাব দূর করতে ব্যবহার করা হয়েছিল, যেমন প্রবাহের হার এবং স্থির ক্ষতি, ধরে রাখার মানগুলিতে।আপেক্ষিক ধারণ মানের মান পরীক্ষিত নমুনার একটি উপাদান বা কৃত্রিমভাবে যোগ করা যৌগ হতে পারে।
3. ধরে রাখার সূচক
ধারণ সূচক হল একটি নির্দিষ্ট দ্রবণ X-এ পরীক্ষা করা পদার্থের ধারণ সূচক। দুটি n-অ্যালেন রেফারেন্স পদার্থ হিসাবে নির্বাচিত হয়, যার একটিতে N কার্বন নম্বর এবং অন্যটিতে N+n রয়েছে।তাদের সামঞ্জস্যপূর্ণ ধরে রাখার সময় যথাক্রমে t'r (N) এবং t'r (N + n), যাতে আমি পরীক্ষা করা পদার্থের সামঞ্জস্যপূর্ণ ধরে রাখার সময় t'r (i) ঠিক তাদের মধ্যে থাকে, অর্থাৎ, t'r (N).

image4

ধরে রাখার সূচক নিম্নরূপ গণনা করা যেতে পারে।

চিত্র5

4. ক্যাপাসিটি ফ্যাক্টর (k)
ভারসাম্যের সময়, স্থির দশায় (গুলি) একটি উপাদানের ভরের অনুপাত মোবাইল ফেজ (m), যাকে ক্ষমতা ফ্যাক্টর বলা হয়।সূত্রটি নিম্নরূপ:
image6
5、পার্টিশন সহগ (K) ভারসাম্যের মধ্যে, স্থির ফেজ (গুলি) থেকে মোবাইল ফেজ (m) এ একটি উপাদানের ঘনত্বের অনুপাত, যাকে পার্টিশন সহগ বলা হয়।সূত্রটি নিম্নরূপ
image7
K এবং k মধ্যে সম্পর্ক:

এটি কলামের ধরন এবং এর গিঁট গঠনের গুরুত্বপূর্ণ বৈশিষ্ট্যগুলিকে প্রতিফলিত করে
image8

সারাংশ

ধরে রাখার মান এবং ক্ষমতা ফ্যাক্টর এবং পার্টিশন সহগের মধ্যে সম্পর্ক:

ক্রোমাটোগ্রাফিক বিচ্ছেদ একটি নির্দিষ্ট আপেক্ষিক নমুনায় প্রতিটি উপাদানের শোষণ বা দ্রবীভূত করার ক্ষমতার পার্থক্যের উপর ভিত্তি করে, যা পার্টিশন সহগ K (বা ক্ষমতা ফ্যাক্টর k) মানের আকার দ্বারা পরিমাণগতভাবে প্রকাশ করা যেতে পারে।
শক্তিশালী শোষণ বা দ্রবীভূত করার ক্ষমতা সহ উপাদানগুলির বড় পার্টিশন সহগ (বা ক্ষমতা ফ্যাক্টর) এবং দীর্ঘ ধরে রাখার সময় রয়েছে।বিপরীতভাবে, দুর্বল শোষণ বা দ্রাব্যতা সহ উপাদানগুলির একটি ছোট পার্টিশন সহগ এবং একটি সংক্ষিপ্ত ধরে রাখার সময় থাকে।
ক্রোমাটোগ্রাফির মৌলিক তত্ত্ব
1. ট্রে তত্ত্ব
(1) সামনে রাখুন -- থার্মোডাইনামিক তত্ত্ব
এটি মার্টিন এবং সিঞ্জের প্রস্তাবিত টাওয়ার প্লেট মডেল দিয়ে শুরু হয়েছিল।
ভগ্নাংশ কলাম: বিভিন্ন বিচ্ছেদের স্ফুটনাঙ্ক অনুযায়ী গ্যাস-তরল ভারসাম্যের বেশ কয়েকবার ট্রেতে।
কলাম: উপাদান দুটি পর্যায়গুলির মধ্যে একাধিক পার্টিশন দ্বারা ভারসাম্যপূর্ণ এবং বিভিন্ন পার্টিশন সহগ অনুযায়ী পৃথক করা হয়।
(2) হাইপোথিসিস
(1) কলামে অনেকগুলি ট্রে রয়েছে এবং উপাদানগুলি দ্রুত ট্রে ব্যবধানের মধ্যে (অর্থাৎ, ট্রেটির উচ্চতা) বন্টন ভারসাম্যে পৌঁছাতে পারে।
(2) মোবাইল ফেজ কলামে প্রবেশ করে, ক্রমাগত নয় কিন্তু স্পন্দিত হয়, অর্থাৎ প্রতিটি প্যাসেজ একটি কলামের আয়তন।
(3) যখন প্রতিটি কলাম প্লেটে নমুনা যোগ করা হয়েছিল, তখন কলাম অক্ষ বরাবর নমুনার বিস্তার উপেক্ষিত হতে পারে।
(4) পার্টিশন সহগ সমস্ত ট্রেতে সমান, উপাদানের পরিমাণ থেকে স্বাধীন।অর্থাৎ, পার্টিশন সহগ প্রতিটি ট্যাবনে স্থির থাকে।
(3) নীতি
ইমেজ9
ট্রে তত্ত্বের পরিকল্পিত চিত্র
যদি একক ভরের একটি উপাদান, যেমন m=1 (উদাহরণস্বরূপ, 1mg বা 1μg), নং 0 ট্রেতে যোগ করা হয় এবং বন্টন ভারসাম্যের পরে, কারণ k=1, যথা ns=nm, nm=ns=0.5।
যখন ক্যারিয়ার গ্যাসের একটি প্লেট ভলিউম (lΔV) স্পন্দন আকারে প্লেট 0-এ প্রবেশ করে, তখন গ্যাস পর্যায়ে nm উপাদান ধারণকারী ক্যারিয়ার গ্যাসকে প্লেট 1-এ ঠেলে দেওয়া হয়। এই সময়ে, প্লেট 0-এর তরল পর্যায়ে ns উপাদান এবং প্লেট 1 এর গ্যাস পর্যায়ের nm উপাদান দুটি পর্যায়ের মধ্যে পুনরায় বিতরণ করা হবে।সুতরাং, প্লেট 0-এ থাকা উপাদানগুলির মোট পরিমাণ হল 0.5, যার মধ্যে গ্যাস এবং তরল পর্যায়গুলি প্রতিটি 0.25, এবং প্লেট 1-এ থাকা মোট পরিমাণও 0.5।গ্যাস এবং তরল পর্যায়গুলিও 0.25 ছিল।
এই প্রক্রিয়াটি প্রতিবার পুনরাবৃত্তি হয় যখন একটি নতুন প্লেট ভলিউম ক্যারিয়ার গ্যাস কলামে স্পন্দিত হয় (নীচের টেবিলটি দেখুন)।
image10
(4) ক্রোমাটোগ্রাফিক বহিঃপ্রবাহ বক্ররেখা সমীকরণ
image11
σ হল প্রমিত বিচ্যুতি, ধরে রাখার সময়, C হল যে কোন সময়ে ঘনত্ব,
C, হল ইনজেকশন ঘনত্ব, অর্থাৎ, মোট উপাদানের পরিমাণ (পিক এলাকা A)।

(5) কলাম দক্ষতা পরামিতি
image12

একটি ধ্রুবক tR-এ, W বা w 1/2 (অর্থাৎ, সংকীর্ণ শিখর), তাত্ত্বিক প্লেট n-এর সংখ্যা যত বেশি হবে, তাত্ত্বিক প্লেটের উচ্চতা তত ছোট হবে এবং কলামের বিচ্ছেদ দক্ষতা তত বেশি হবে।কার্যকর তত্ত্ব ট্রে নেফের ক্ষেত্রেও একই কথা।অতএব, ট্রেগুলির তাত্ত্বিক সংখ্যা কলামের কার্যকারিতা মূল্যায়ন করার জন্য একটি সূচক।

(5) বৈশিষ্ট্য এবং ত্রুটিগুলি
> সুবিধা
ট্রে তত্ত্বটি আধা-অভিজ্ঞতামূলক এবং বহিঃপ্রবাহ বক্ররেখার আকৃতি ব্যাখ্যা করে
উপাদানগুলির বিভাজন এবং পৃথকীকরণ প্রক্রিয়াগুলি চিত্রিত করা হয়েছে
কলামের কার্যকারিতা মূল্যায়ন করার জন্য একটি সূচক প্রস্তাব করা হয়েছে
> সীমাবদ্ধতা
উপাদান দুটি পর্যায়ে সত্যিই বিতরণ ভারসাম্য পৌঁছাতে পারে না:
কলামে উপাদানগুলির অনুদৈর্ঘ্য প্রসারণ উপেক্ষা করা যাবে না:
ভর স্থানান্তর প্রক্রিয়ার উপর বিভিন্ন গতিশীল কারণের প্রভাব বিবেচনা করা হয়নি।
কলাম প্রভাব এবং মোবাইল ফেজের প্রবাহ বেগের মধ্যে সম্পর্ক ব্যাখ্যা করা যাবে না:
কলামের প্রভাবকে কী প্রধান কারণগুলি প্রভাবিত করে তা স্পষ্ট নয়
হার তত্ত্বে এই সমস্যাগুলি সন্তোষজনকভাবে সমাধান করা হয়।

2. হার তত্ত্ব
1956 সালে, ডাচ পণ্ডিত VanDeemter et al.ট্রে তত্ত্বের ধারণাকে শোষিত করে, এবং ট্রে-র উচ্চতাকে প্রভাবিত করে এমন গতিগত কারণগুলিকে একত্রিত করে, ক্রোমাটোগ্রাফিক প্রক্রিয়ার গতি তত্ত্ব - হার তত্ত্বকে সামনে রেখেছিল এবং ভ্যানডিমটার সমীকরণ তৈরি করেছিল।এটি ক্রোমাটোগ্রাফিক প্রক্রিয়াটিকে একটি গতিশীল অ-ভারসাম্য প্রক্রিয়া হিসাবে বিবেচনা করে এবং শিখর বিস্তৃতির (অর্থাৎ, কলাম প্রভাব) উপর গতিশীল কারণগুলির প্রভাব অধ্যয়ন করে।
পরে, Giddings এবং Snyder et al.ভ্যানডিমটার সমীকরণ (পরে গ্যাস ক্রোমাটোগ্রাফি রেট সমীকরণ বলা হয়) এবং তরল এবং গ্যাসের মধ্যে সম্পত্তির পার্থক্য অনুসারে তরল ক্রোমাটোগ্রাফি হার সমীকরণ (যেমন গিডিংস সমীকরণ) প্রস্তাব করেছেন।
(1) ভ্যান ডিমটার সমীকরণ

image13
image14

কোথায়: H: বোর্ডের উচ্চতা
A: এডি ডিফিউশন টার্মের সহগ
B: আণবিক প্রসারণ পদের সহগ
C: ভর স্থানান্তর প্রতিরোধের শব্দের সহগ

(2) Giddings সমীকরণ
image15
পরিমাণগত এবং গুণগত বিশ্লেষণ
(1) গুণগত বিশ্লেষণ
গুণগত ক্রোমাটোগ্রাফিক বিশ্লেষণ হল প্রতিটি ক্রোমাটোগ্রাফিক শিখর দ্বারা উপস্থাপিত যৌগগুলি নির্ধারণ করা।যেহেতু বিভিন্ন পদার্থের নির্দিষ্ট ক্রোমাটোগ্রাফিক অবস্থার অধীনে নির্দিষ্ট ধরে রাখার মান রয়েছে, তাই ধরে রাখার মান একটি গুণগত সূচক হিসাবে ব্যবহার করা যেতে পারে।বিভিন্ন ক্রোমাটোগ্রাফিক গুণগত পদ্ধতি বর্তমানে ধরে রাখার মানগুলির উপর ভিত্তি করে।
যাইহোক, একই ক্রোমাটোগ্রাফিক অবস্থার অধীনে বিভিন্ন পদার্থের অনুরূপ বা অভিন্ন ধারণ মান থাকতে পারে, অর্থাৎ ধরে রাখার মানগুলি একচেটিয়া নয়।সুতরাং শুধুমাত্র ধরে রাখার মানগুলির উপর ভিত্তি করে একটি সম্পূর্ণ অজানা নমুনা চিহ্নিত করা কঠিন।যদি নমুনার উত্স, প্রকৃতি এবং উদ্দেশ্য বোঝার ভিত্তিতে, নমুনার রচনার একটি প্রাথমিক রায় তৈরি করা যেতে পারে এবং ক্রোমাটোগ্রাফিক শিখর দ্বারা প্রতিনিধিত্ব করা যৌগ নির্ধারণ করতে নিম্নলিখিত পদ্ধতিগুলি ব্যবহার করা যেতে পারে।
1. বিশুদ্ধ পদার্থ ব্যবহার করে গুণগত নিয়ন্ত্রণ
নির্দিষ্ট ক্রোমাটোগ্রাফিক অবস্থার অধীনে, একটি অজানা শুধুমাত্র একটি সংজ্ঞায়িত ধরে রাখার সময় আছে।অতএব, একই ক্রোমাটোগ্রাফিক অবস্থার অধীনে পরিচিত বিশুদ্ধ পদার্থের ধরে রাখার সময়কে অজানা পদার্থের ধরে রাখার সময়ের সাথে তুলনা করে অজানাকে গুণগতভাবে চিহ্নিত করা যেতে পারে।যদি দুটি একই হয়, অজানা পদার্থটি একটি পরিচিত বিশুদ্ধ পদার্থ হতে পারে;অন্যথায়, অজানা বিশুদ্ধ পদার্থ নয়।
বিশুদ্ধ পদার্থ নিয়ন্ত্রণ পদ্ধতি শুধুমাত্র অজানা পদার্থের জন্য প্রযোজ্য যার গঠন জানা গেছে, যার গঠন তুলনামূলকভাবে সহজ এবং যার বিশুদ্ধ পদার্থ জানা গেছে।
2. আপেক্ষিক ধারণ মান পদ্ধতি
আপেক্ষিক ধারণ মান α, উপাদান i এবং রেফারেন্স উপকরণের মধ্যে সমন্বয়কে বোঝায় ধারণ মানের অনুপাত:

a10

এটি শুধুমাত্র ফিক্সেটিভ এবং কলাম তাপমাত্রার পরিবর্তনের সাথে পরিবর্তিত হয় এবং অন্যান্য অপারেটিং অবস্থার সাথে কোন সম্পর্ক নেই।

একটি নির্দিষ্ট স্থির পর্যায় এবং কলাম তাপমাত্রায়, উপাদান i এবং রেফারেন্স পদার্থ s এর সামঞ্জস্যপূর্ণ ধরে রাখার মানগুলি যথাক্রমে পরিমাপ করা হয় এবং তারপরে উপরের সূত্র অনুসারে গণনা করা হয়।প্রাপ্ত আপেক্ষিক ধরে রাখার মানগুলি সাহিত্যের সংশ্লিষ্ট মানগুলির সাথে গুণগতভাবে তুলনা করা যেতে পারে।
3, শিখর উচ্চতা পদ্ধতি বাড়ানোর জন্য পরিচিত পদার্থ যোগ করা
যখন অজানা নমুনায় অনেকগুলি উপাদান থাকে, তখন প্রাপ্ত ক্রোমাটোগ্রাফিক শিখরগুলি এত ঘন হয় যে উপরের পদ্ধতি দ্বারা সহজেই সনাক্ত করা যায়, বা যখন অজানা নমুনা শুধুমাত্র নির্দিষ্ট আইটেম বিশ্লেষণের জন্য ব্যবহার করা হয়।
"প্রথমে একটি অজানা নমুনার একটি ক্রোমাটোগ্রাম তৈরি করা হয়, এবং তারপরে অজানা নমুনায় একটি পরিচিত পদার্থ যোগ করে আরও একটি ক্রোমাটোগ্রাম পাওয়া যায়।"বর্ধিত শিখর উচ্চতা সহ উপাদানগুলি এই জাতীয় পদার্থের জন্য পরিচিত হতে পারে।
4. সূচকের গুণগত পদ্ধতি বজায় রাখুন
ধরে রাখার সূচকটি ফিক্সেটিভগুলিতে পদার্থের ধরে রাখার আচরণকে উপস্থাপন করে এবং বর্তমানে এটি জিসি-তে সর্বাধিক ব্যবহৃত এবং আন্তর্জাতিকভাবে স্বীকৃত গুণগত সূচক।এটিতে ভাল প্রজননযোগ্যতা, অভিন্ন মান এবং ছোট তাপমাত্রা সহগ সুবিধা রয়েছে।
ধারণ সূচক শুধুমাত্র স্থির ফেজ এবং কলাম তাপমাত্রার বৈশিষ্ট্যের সাথে সম্পর্কিত, কিন্তু অন্যান্য পরীক্ষামূলক অবস্থার সাথে নয়।এর নির্ভুলতা এবং প্রজননযোগ্যতা চমৎকার।যতক্ষণ না কলামের তাপমাত্রা স্থির পর্যায়ের সমান থাকে, ততক্ষণ সাহিত্যের মান সনাক্তকরণের জন্য প্রয়োগ করা যেতে পারে, এবং তুলনা করার জন্য বিশুদ্ধ উপাদান ব্যবহার করার প্রয়োজন নেই।
(2) পরিমাণগত বিশ্লেষণ
ক্রোমাটোগ্রাফিক পরিমাণ নির্ধারণের ভিত্তি:
পরিমাণগত বিশ্লেষণের কাজ হল মিশ্র নমুনায় শত শত উপাদান খুঁজে বের করা।
ভগ্নাংশ বিষয়বস্তু.ক্রোমাটোগ্রাফিক পরিমাপ নিম্নলিখিত উপর ভিত্তি করে ছিল: যখন অপারেটিং শর্ত সামঞ্জস্যপূর্ণ ছিল, ছিল

পরিমাপকৃত উপাদানের ভর (বা ঘনত্ব) সনাক্তকারী দ্বারা প্রদত্ত প্রতিক্রিয়া সংকেত দ্বারা নির্ধারিত হয়
এটা সমানুপাতিক.যথা:

a11

ক্রোমাটোগ্রাফিক পরিমাণ নির্ধারণের ভিত্তি:
পরিমাণগত বিশ্লেষণের কাজ হল মিশ্র নমুনায় শত শত উপাদান খুঁজে বের করা।
ভগ্নাংশ বিষয়বস্তু.ক্রোমাটোগ্রাফিক পরিমাপ নিম্নলিখিত উপর ভিত্তি করে ছিল: যখন অপারেটিং শর্ত সামঞ্জস্যপূর্ণ ছিল, ছিল
পরিমাপকৃত উপাদানের ভর (বা ঘনত্ব) সনাক্তকারী দ্বারা প্রদত্ত প্রতিক্রিয়া সংকেত দ্বারা নির্ধারিত হয়
এটা সমানুপাতিক.যথা:

1. পিক এলাকা পরিমাপ পদ্ধতি
পিক এলাকা হল ক্রোমাটোগ্রাম দ্বারা প্রদত্ত মৌলিক পরিমাণগত তথ্য, এবং পিক এলাকা পরিমাপের নির্ভুলতা পরিমাণগত ফলাফলকে সরাসরি প্রভাবিত করে।ক্রোমাটোগ্রাফিক শিখরগুলির জন্য বিভিন্ন শিখর আকারের জন্য বিভিন্ন পরিমাপ পদ্ধতি ব্যবহার করা হয়েছিল।
পরিমাণগত বিশ্লেষণে শীতের সঠিক মূল্য খুঁজে পাওয়া কঠিন:
একদিকে পরম ইনজেকশন ভলিউম সঠিকভাবে পরিমাপ করার অসুবিধার কারণে: অন্যদিকে
শিখর এলাকা ক্রোমাটোগ্রাফিক অবস্থার উপর নির্ভরশীল, এবং যখন মান পরিমাপ করা হয় তখন ক্রোমাটোগ্রাফিক স্ট্রিপ বজায় রাখা উচিত
একই জিনিস করা সম্ভব বা সুবিধাজনক নয়।এবং যদি আপনি এটি ঠিক পেতে পারেন
সঠিক মান, কারণ কোন একীভূত মান নেই এবং সরাসরি প্রয়োগ করা যাবে না।
image18

2. পরিমাণগত সংশোধন ফ্যাক্টর

পরিমাণগত সংশোধন ফ্যাক্টরের সংজ্ঞা: ডিটেক্টরে প্রবেশকারী উপাদানের পরিমাণ (মি)
এর ক্রোমাটোগ্রাফিক পিক এরিয়া (A) বা সর্বোচ্চ উচ্চতা () এর অনুপাত একটি সমানুপাতিক ধ্রুবক (,
সমানুপাতিক ধ্রুবককে কম্পোনেন্টের পরম সংশোধন ফ্যাক্টর বলা হয়।

a12
পরিমাণগত বিশ্লেষণে শীতের সঠিক মূল্য খুঁজে পাওয়া কঠিন:
একদিকে পরম ইনজেকশন ভলিউম সঠিকভাবে পরিমাপ করার অসুবিধার কারণে: অন্যদিকে
শিখর এলাকা ক্রোমাটোগ্রাফিক অবস্থার উপর নির্ভরশীল, এবং যখন মান পরিমাপ করা হয় তখন ক্রোমাটোগ্রাফিক স্ট্রিপ বজায় রাখা উচিত
একই জিনিস করা সম্ভব বা সুবিধাজনক নয়।এবং যদি আপনি এটি ঠিক পেতে পারেন
সঠিক মান, কারণ কোন একীভূত মান নেই এবং সরাসরি প্রয়োগ করা যাবে না।
a13
অর্থাৎ, একটি উপাদানের আপেক্ষিক সংশোধন ফ্যাক্টর হল উপাদান এবং রেফারেন্স উপাদান s
পরম সংশোধন কারণের অনুপাত।

a14
এটা দেখা যায় যে আপেক্ষিক সংশোধন ফ্যাক্টর যখন উপাদানের মান বনাম মান।
যখন পদার্থ s সমান হয়, রেফারেন্স উপাদানের সর্বোচ্চ ক্ষেত্রটি উপাদানটির শীর্ষ এলাকা
একাধিক।যদি কিছু উপাদানের ভর m এবং সর্বোচ্চ এলাকা A থাকে, তাহলে f'A সংখ্যা
এর ভর সহ রেফারেন্স উপাদানের সর্বোচ্চ ক্ষেত্রফলের সমান।অন্য কথায়,
আপেক্ষিক সংশোধন ফ্যাক্টরের মাধ্যমে, প্রতিটি উপাদানের শীর্ষ এলাকাগুলিকে আলাদা করা যেতে পারে
তার ভরের সমান রেফারেন্স উপাদানের শিখর এলাকায় রূপান্তরিত, তারপর অনুপাত
মান একীভূত হয়.সুতরাং এটি প্রতিটি উপাদানের শতাংশ বের করার স্বাভাবিক পদ্ধতি
পরিমাণের ভিত্তি।
আপেক্ষিক সংশোধন ফ্যাক্টর পাওয়ার পদ্ধতি: আপেক্ষিক সংশোধন ফ্যাক্টর মান শুধুমাত্র সত্তা সঙ্গে তুলনা করা হয়
পরিমাপটি স্ট্যান্ডার্ড এবং ডিটেক্টরের ধরণের সাথে সম্পর্কিত, তবে অপারেশন স্ট্রিপের সাথে
এটা কোন ব্যাপার না.অতএব, সাহিত্যের রেফারেন্স থেকে মূল্য পুনরুদ্ধার করা যেতে পারে।যদি টেক্সট
আপনি যদি অফারটিতে পছন্দসই মান খুঁজে না পান তবে আপনি নিজেও এটি নির্ধারণ করতে পারেন।নির্ণয়ের পদ্ধতি
পদ্ধতি: পরিমাপ করা পদার্থের একটি নির্দিষ্ট পরিমাণ দশটি নির্বাচিত রেফারেন্স উপাদান → একটি নির্দিষ্ট ঘনত্বে তৈরি
দুটি উপাদানের মধ্যে ক্রোমাটোগ্রাফিক শিখর অঞ্চল A এবং As পরিমাপ করা হয়েছিল।
এটাই সূত্র।

a15
3. পরিমাণগত গণনা পদ্ধতি
(1) এলাকা স্বাভাবিকীকরণ পদ্ধতি
সমস্ত পিক-মুক্ত ভগ্নাংশের বিষয়বস্তুর যোগফল পরিমাপের জন্য 100% হিসাবে গণনা করা হয়েছিল
পদ্ধতিটিকে স্বাভাবিককরণ বলা হয়।এর গণনার সূত্রটি নিম্নরূপ:
a16
যেখানে P,% হল পরীক্ষিত উপাদানগুলির শতাংশের বিষয়বস্তু;A1, A2... A n হল উপাদান 1. 1~n এর সর্বোচ্চ এলাকা;f'1, f'2... f'n হল 1 থেকে n উপাদানের আপেক্ষিক সংশোধন ফ্যাক্টর।

(2) বহিরাগত মান পদ্ধতি
নমুনায় পরীক্ষা করা উপাদানের প্রতিক্রিয়া সংকেত এবং নিয়ন্ত্রণ হিসাবে পরীক্ষা করা বিশুদ্ধ উপাদানের মধ্যে পরিমাণগত তুলনা করার পদ্ধতি।
(3) অভ্যন্তরীণ মান পদ্ধতি
তথাকথিত অভ্যন্তরীণ স্ট্যান্ডার্ড পদ্ধতি হল এমন একটি পদ্ধতি যেখানে পরীক্ষিত পদার্থের স্ট্যান্ডার্ড দ্রবণে একটি নির্দিষ্ট পরিমাণ বিশুদ্ধ পদার্থ যোগ করা হয় এবং একটি অভ্যন্তরীণ মান হিসাবে নমুনা সমাধান করা হয় এবং তারপরে বিশ্লেষণ এবং নির্ধারণ করা হয়।
(3) আদর্শ সংযোজন পদ্ধতি
আদর্শ সংযোজন পদ্ধতি, যা অভ্যন্তরীণ সংযোজন পদ্ধতি নামেও পরিচিত, একটি নির্দিষ্ট পরিমাণ (△C) যোগ করা হয়।
পরীক্ষার পদার্থের রেফারেন্সটি পরীক্ষা করার জন্য নমুনা দ্রবণে যোগ করা হয়েছিল এবং পরীক্ষাটি পরীক্ষায় যোগ করা হয়েছিল
পদার্থের পরে নমুনা দ্রবণের শিখর মূল নমুনা দ্রবণের চেয়ে বেশি ছিল
ক্ষেত্রফলের বৃদ্ধি (△A) নমুনা সমাধানে পদার্থের ঘনত্ব গণনা করতে ব্যবহৃত হয়েছিল
বিষয়বস্তু (Cx)
a17
যেখানে Ax হল মূল নমুনায় পরিমাপ করা পদার্থের সর্বোচ্চ এলাকা।
image25
image26
ছবি27


পোস্টের সময়: মার্চ-27-2023